舌后部的三能性Lgr5干细胞产生舌头、味觉和唾液腺谱系

舌后部的环状和叶状含有靠近专门唾液腺的味蕾，这些腺体称为冯·埃布纳腺。味蕾与这些唾液腺之间的发育关系已被提出，但在出生后和成年阶段仍大多未被充分探讨。小鼠的谱系追踪研究显示，Lgr5标记味蕾干细胞。本研究报告了小鼠整个环状和叶状的单细胞RNA测序，提供了舌表上皮、味蕾及相关和非关联唾液腺细胞的转录图谱。我们揭示了一个发育轨迹，其中味蕾、相关的唾液腺以及非味觉舌面上皮起源于一个常见的Lgr5细胞。我们在体外克隆水平和体内多色谱系追踪中确认...

Kv11.1钾通道的激活通过促进c-Myc降解，抑制非小细胞肺癌的生长

Kv11.1钾通道和转录因子c-Myc在调控细胞稳态中都起着基础作用。癌症利用失调的c-Myc和Kv11.1，但关于这些蛋白之间可能的关联知之甚少。本研究发现，c-MYC与Kv11.1在某些肺腺癌中存在反向关系。重要的是，表达较高Kv11.1通道水平的患者，整体生存率优于表达低的患者。因此，我们评估了肺癌中药理激活Kv11.1通道可能损害肿瘤生长的假说。我们发现Kv11.1的激活通过诱导衰老表型来抑制肺癌的生长。此外，我们发现药物Kv1...

BRSK2通过PIK3C3途径参与自噬以及癌细胞在营养剥夺压力下的生长和存活中发挥作用

巨自噬/自噬是一种应激响应的溶酶体分解代谢途径，促进细胞稳态和肿瘤细胞存活，但其在乳腺癌进展和转移中的作用尚不明确。本文我们展示了一种大脑特异性的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶BRSK2，作为乳腺癌患者侵袭性转移疾病的标志物，在调节自噬中至关重要。BRSK2在侵袭性癌症中表达过多，且与疾病特异性生存率降低有关。BRSK2还调控基础自噬，激活AKT、STAT3和NF-κB介导的癌细胞存活通路。此外，BRSK2的过度表达会增加乳腺癌细胞中炎症细胞因...

遗传因素促进癌细胞中染色体外DNA的保留

染色体外DNA（ecDNA）是一种常见且毁灭性的癌基因扩增形式 1,2.圆形兆碱基大小的ecDNA缺乏着丝粒，在细胞分裂过程中随机分离3,4,5,6并且会延续许多代人。自从ecDNA首次被观察到能在有丝分裂染色体上搭便车进入子细胞核以来，已经过去了40多年，但这一过程背后的机制仍然不清楚 3,7.我们鉴定出一类人类基因组元素，称为保留元件，它们将表异体与有丝分裂染色体连接，以增加ecDNA向子细胞的传递。利用我们开发的基因组尺度检测法R...

哺乳动物大脑内源性蛋白亚群的单细胞突触图谱绘制

不同的空间或时间蛋白质群体，如细胞表面/细胞内或已有/新生亚群体，决定了神经元体内单个突触的基础功能和活动诱导功能。在这里，我们开发了一个简单且可推广的平台，用于成像哺乳动物大脑中数千个突触中不同空间和时间内源性蛋白质亚群的图像。该平台基于开发、改进和集成CRISPR-Cas9介导的蛋白质标记方法、化学标签标记技术以及半自动分析流程。该联合平台能够在活体或固定小鼠大脑中，单个神经元数千个突触处绘制内源性蛋白质（如受体、支架和信号蛋白）的...

Olig1/2 在哺乳动物皮层胶质生成和胶质形成过程中，协调祖细胞的命运

在皮层胶质生成过程中，三电位中间前体细胞（Tri-IPCs）分化为少突胶质前体细胞（OPCs）或嗅球中间神经元前体细胞（OBIN-IPCs）——这是在胶质母细胞瘤（GBM）中常用来驱动肿瘤发生的发育程序。本研究显示，转录因子Olig1/2通过双重转录机制协调调控Tri-IPC命运指定：它们激活OPC指定，同时通过直接抑制Gsx2表达抑制OBIN-IPC的生成。Olig1/2的遗传消融将Tri-IPCs从产生增殖性OPCs转向产生非增殖性...

死前和死后固定剂灌注对神经组织制备质量的比较研究

通常建议在死前进行固定剂经心灌注，用于高质量的脑组织学准备，确保快速且深入地渗透组织，以保护最脆弱的脑结构。尽管该手术在麻醉和适当的镇痛下进行，但对实验者来说仍然繁琐，并引发伦理问题。最近，基于先行动物安乐死后向循环注射固定剂的替代方案被提出。这些所谓的死后灌注方案理论上应确保组织固定质量相当，同时不使活体动物接受手术。在采用这一新方法之前，有必要验证样本质量是否等同，确保科学结果的有效性。我们对多种通过死前或死后经心腔灌注固定组织的方...

临床前模型中claudin18.2定向CAR-T细胞的靶向肿瘤外毒性

克劳丁18.2（CLDN18.2）靶向CAR-T细胞疗法在胃癌中已显示出有前景的临床疗效。然而，早期试验报告了由于胃黏膜中CLDN18.2在靶点外肿瘤识别而导致的胃肠道不良事件。通过利用共享的CLDN18.2表位及其在人类和小鼠中的表达，我们建立了一个体内模型，能够复制CLDN18.2 CAR-T靶向肿瘤外毒性。我们的发现证实，这种毒性与CAR构念的设计、共刺激结构域和肿瘤模型无关。此外，我们还展示了该模型在测试减缓靶点毒性策略（如布尔...

神经病变相关 Tecpr2 突变敲入小鼠揭示神经元和小胶质细胞中内溶酶体功能丧失表型

编码 Tectonic β-propeller repeat-containing repeat protein 2 （TECPR2） 的基因突变会导致遗传性感觉和自主神经病变亚型 9 （HSAN9），这是一种涉及感觉和周围神经系统的致命神经发育和神经退行性疾病。TECPR2 普遍表达并与细胞内的运输和分选有关，然而，其功能作用仍然不明确。此外，缺乏对 HSAN9 潜在致病机制的分子见解。在这里，我们报告了一种新型小鼠模型，该模型携带导...

乳腺癌细胞在体外和 I-SPY 试验中对抗有丝分裂剂的 CHFR 表达和敏感性

CHFR 编码一种 E3 泛素连接酶，以前与调节有丝分裂前检查点和对紫杉烷的反应有关，在乳腺癌的子集中被沉默。在这里，我们评估了 CHFR 表达差异对体外对各种抗有丝分裂剂敏感性以及临床环境中对新辅助紫杉烷治疗反应的影响。人乳腺癌细胞系中的集落形成测定和活细胞成像表明，CHFR 下调与体外对 PLK1 抑制剂和紫杉醇的敏感性增加有关，这反映了有丝分裂过早退出和多核形成增加。为了评估 CHFR 表达与新辅助紫杉烷反应之间的关系，我们利用免...

在生理温度下通过RNase抑制剂混合物在活体人细胞中延长寿命的化学未修饰RNA的细胞内核磁共振谱

拥挤的细胞内环境会影响RNA结构和相互作用。虽然细胞内核磁共振 （NMR） 波谱可以对活体人体细胞中的 RNA 进行原子分辨率研究，但由于 RNA 快速降解，其应用受到限制。在这项研究中，我们将 RNase 抑制剂混合物引入活体人体细胞中，并获得了与 HIV-1 Tat 强结合的 RNA 适体的细胞内 NMR 光谱，无论是否含有源自 Tat 的肽。引入RNase抑制剂混合物有效抑制了RNA降解。显着延长的寿命使得在生理温度下能够观察活体...

Piezo1调节软基质粘弹性的机械转导

机械敏感离子通道（如 Piezo1）在感知细胞外基质的机械特性方面发挥着重要作用。然而，Piezo1是否以及如何感知与时间相关的基质机械性能，即粘弹性，仍然未知。为了解决这个问题，我们将永生化间充质干细胞系（其中 Piezo1 表达可以沉默）与具有独立可调弹性和粘性模量的柔软和坚硬的粘弹性水凝胶相结合。我们通过实验和通过将 Piezo1 纳入改进的粘弹性分子离合器模型的模拟证明了 Piezo1 是软基质中粘弹性机械转导的调节剂。使用RN...