IF2 和 NusA 之间的复合物表明转录-翻译的早期偶联

翻译起始因子的主要功能是帮助核糖体在 mRNA 上选择正确的阅读框。在重构的体外系统的帮助下，这一过程已被广泛研究，但活细胞中的动力学尚未得到表征。在这项研究中，我们对细菌起始因子 IF2、IF3 以及起始剂 fMet-tRNA 进行了单分子追踪fMet直接在生长中的大肠杆菌细胞中。我们的结果揭示了因子与核糖体关联的动力学，除其他外，突出了 IF2 和 IF3 在该过程中各自的拮抗作用。重要的是，我们对两种天然存在的 IF2 亚型的体内...

囊胚互补产生Flk-1敲除嵌合小鼠驻留巨噬细胞的衍生和肿瘤微环境的构建

肿瘤微环境（TME）与癌症进展和治疗耐药性密切相关。尽管已经通过将人类细胞移植到免疫缺陷小鼠体内来开发人源化小鼠模型，但它们未能完全重建TME。使用 Flk-1（Vegfr2，Kdr）敲除宿主进行囊胚互补提供了一种潜在的解决方案。然而，利用囊胚互补生成种间人鼠嵌合体尚未成功。作为基础步骤，本研究旨在证明可以在种内嵌合小鼠中使用这种方法构建供体来源的TME。我们通过将 Azami-Green （AG） 阳性 C57BL/6 （B6） 小鼠...

重组山羊和犊牛凝乳酶的生化性质比较及其在乳制品加工中的影响

羊奶的营养和功能特性是公认的。然而，在用羊奶制作奶酪时使用骆驼和小牛来源的凝乳糖素会导致生产率相对较低。本研究旨在生产重组山羊乳糜蛋白，并研究其在山羊奶和牛奶中的生化性质和凝乳活性。为了实现这一目标，重组山羊凝乳酶在毕赤酵母中成功表达，产生了 148,000 单位/升的酶活性。重组山羊乳糜蛋白在两种牛奶类型中在60 °C时均表现出最大的酶活性，而重组犊牛乳酶在65 °C时对山羊奶表现出最大活性，在75 °C对牛奶时表现出最大活性。此外，...

DLC1-SF3B1-PHF5A剪接复合物对躯干神经嵴细胞命运和剪接扰动敏感性的测定

普遍表达的剪接因子如何特异性调节神经嵴 （NC） 发育并增强其对剪接扰动的脆弱性仍然知之甚少。在这里，我们表明，NC特异性DLC1与SF3B1-PHF5A剪接复合物合作，通过调节NC说明符SOX9和SNAI2前体mRNA而不是其上游调节因子BMP4，WNT1和PAX7的剪接，对于确定鸟类树干NC细胞的命运至关重要。 从机制上讲，SF3B1-PHF5A与所有因子的内含子分支位点（BS）序列结合，而DLC1与SOX9和SNAI2的BS序列附...

肠簇细胞亚型代表由隐窝-绒毛信号梯度驱动的连续成熟阶段

肠簇细胞是上皮前哨细胞，在检测到寄生虫衍生的化合物后触发宿主防御。虽然它们代表了炎症驱动的肠道疾病免疫调节疗法的有效靶点，但人们对它们的功能和分化知之甚少。在这里，我们揭示了先前描述的小鼠和人类簇绒-1和簇绒-2亚型中常见的中间转录组。类器官中簇绒细胞亚型特异性报告基因敲入表明，这两种亚型反映了簇绒细胞谱系内连续的有丝分裂后成熟阶段。白细胞介素-4和13的体外刺激足以促进由簇绒前体（tuft-p）产生的新Nrep + 簇绒-1细胞的产生...

靶向SLC7A5治疗肺鳞状细胞癌：对癌症代谢转变和硼中子捕获治疗耐药性的影响

由于缺乏有效的治疗方法，鳞状细胞癌 （SCC） 构成了重大的全球健康挑战。硼中子俘获疗法（BNCT）是一种靶向粒子疗法，在各种癌症中显示出有希望的结果。SLC7A5 是 BNCT 中使用的必需氨基酸和硼苯丙氨酸 （BPA） 的转运蛋白，成为潜在的治疗靶点。然而，其在不同组织学亚型中的表达以及 SLC7A5 抑制在对 BPA-BNCT 耐药性中的作用仍然知之甚少。我们的研究表明，大多数 SCC 中的 SLC7A5 表达升高，特别是在肺鳞状...

祖细胞能力的时间控制决定了小鼠 GABA 能神经元发育的成熟

不同类型的 GABA 能投射神经元和端脑中间神经元来源于称为神经节隆起的腹侧生发区的祖细胞。使用单细胞转录组学、染色质可及性分析、谱系追踪、出生日期、跨发育阶段的移植和小鼠胚胎的扰动测序，我们研究了祖细胞能力如何影响这些神经元的成熟和分化。我们发现，神经发生的时间进程塑造了神经节隆起祖细胞的成熟能力，影响它们的后代如何走向成熟状态。相比之下，分化能力（定义为祖细胞产生不同转录组身份的能力）在整个神经发生过程中保持不变。染色质重塑与由转录...

质粒中 IL-12 和 CD40 配体 （CD154） 的瘤内表达产生消除肿瘤 T reg 的抗肿瘤反应

瘤内免疫疗法 （ITIT） 致力于通过直接刺激肿瘤中的免疫系统来逆转局部肿瘤介导的免疫抑制，从而产生有效的抗肿瘤免疫。使用体内质粒转染作为瘤内癌症免疫疗法的白细胞介素 12 （IL-12） 的体内表达进入转移性黑色素瘤的 II 期临床试验，但临床成功率有限。我们试图通过在编码 IL-12 的质粒治疗中加入表达 CD154 （CD40 配体） 的质粒来提高体内 IL-12 电穿孔的疗效，并评估对实体瘤的疗效。患有皮内 B16F10 黑色素...

基于质粒的电穿孔在永生化 T 淋巴细胞中进行高效基因工程

突出首次全面表征永生化 T 细胞系 CTLL-2 和 HT-2。质粒电穿孔可实现高效且具有成本效益的 T 细胞工程。用于 T 细胞电穿孔的优化转基因启动子和质粒结构。多功能转基因递送策略简化了 T 细胞工程工作流程。用于精确 T 细胞工程的高效 CRISPR/Cas9 基因组编辑工具包。摘要转基因 T 细胞疗法最近的临床成功凸显了加速 T 淋巴细胞基础研究和功能筛选方法的迫切需要。然而，一种简单且具有成本效益的 T 细胞高效基因工程方法...

植物中基于纳米材料的基因递送：即将到来的基因革命？

突出转基因允许将有益性状（如抗虫害和改善营养）引入作物，从而有助于满足全球粮食需求并提高农业复原力。农杆菌介导的转化和生物列表学等传统方法面临效率低、组织损伤和不可预测的基因整合等问题，这些问题限制了其有效性。纳米颗粒通过克服植物细胞壁障碍来提高基因递送效率和精度。将纳米技术与 CRISPR/Cas 和组织培养方法相结合，可以显著推进植物基因工程。纳米基因递送可以靶向细胞核、叶绿体和线粒体基因组，而不会造成明显的组织损伤，从而提高基因修...

使用噬菌体展示鉴定免疫原性共生抗原

体液免疫在建立和维持宿主-微生物群共生以及对病原微生物的免疫力中起着重要作用。然而，鉴定在屏障和全身组织内引发适应性免疫反应的抗原是进一步理解这种宿主-微生物对话的重大障碍。在这里，我们提供了一种方案，通过使用噬菌体（噬菌体）展示介导的抗体/抗原生物淘选来鉴定共生微生物和病原微生物表达的免疫原性蛋白抗原。该程序需要生成 M13 噬菌粒文库，生产 ORFeome（开放阅读框总量）噬菌体文库，然后进行多轮基于亲和力的免疫沉淀，随后通过 EL...

单纯疱疹病毒 1 型通过小鼠尿嘧啶-DNA 糖基化酶逃避 APOBEC1 介导的免疫

单纯疱疹病毒 1 （HSV-1） 是病毒性脑炎的最常见原因，尽管接受了抗病毒治疗，病毒性脑炎也可能是致命的或导致严重的神经功能缺损。载脂蛋白 B 信使 RNA 编辑酶，催化多肽样 （APOBEC） 蛋白基团可以作为病毒限制因子。HSV-1 如何逃避这种内在免疫机制尚不清楚。在这里，使用人癌 HEp-2 细胞，我们发现 HSV-1 尿嘧啶-DNA 糖基化酶的磷酸化和激活抵消了小鼠 APOBEC1 对 HSV-1 基因组的 DNA 编辑活性...