由人体肠道中常见细菌合成的多肽可改善啮齿动物的新陈代谢

人类肠道微生物群有可能合成可能影响宿主新陈代谢的蛋白质。在这里，我们报告了两种多肽，即 RUMTOR 衍生的肽 （RORDEP） 1 和 RORDEP2，它们在人类血液中循环，并由与人类肥胖成反比的肠道共生瘤胃球菌扭矩的特定菌株合成。在高脂肪饮食的瘦小鼠和饮食诱导的肥胖小鼠中，使用表达 RORDEP 的菌株口服强饲可改善葡萄糖耐量、增加骨密度和减少脂肪量，并增强参与产热和脂肪分解的基因和蛋白质的表达。大鼠腹腔内给予重组RORDEP1降低...

核糖体水平的程序性下降控制着人类早期神经发育

许多神经发育缺陷与参与管家功能的基因有关，例如编码核糖体生物发生因子的基因。核糖体生物发生的减少如何导致组织和发育特异性缺陷仍不清楚。在这里，我们描述了核糖体生物发生因子 AIRIM/C1orf109 中主要与神经发育障碍相关的变异。将人脑类器官与蛋白质组学、单细胞RNA测序和单类器官翻译分析相结合，我们确定了早期大脑发育过程中蛋白质产量的下降。我们发现核糖体水平在神经上皮分化过程中降低，使得分化细胞在此期间特别容易受到核糖体生物发生的...

RING finger E3 连接酶 RNF25 保护 DNA 复制叉，独立于其在泛素信号传导中的经典作用

使细胞能够耐受 DNA 复制应激的 DNA 损伤反应 （DDR） 机制对于基因组稳定性和细胞活力至关重要。使用无偏倚的基因筛选，我们确定了 RING 指 E3 泛素连接酶 RNF25 在促进 DNA 复制应激耐受性方面的作用。为了响应 DNA 复制应激，RNF25 缺陷细胞产生异常高水平的单链 DNA （ssDNA），在 S 期积累并显示有丝分裂进入减少。使用单分子 DNA 纤维分析，我们表明 RNF25 可以保护叉重塑剂 HLTF 产...

人肝细胞扩增及其在三维培养和基因作中的应用

肝细胞是肝脏中最重要的细胞类型之一，执行关键功能。它们对于基于肝细胞的治疗、疾病建模和药物开发至关重要。然而，原代人肝细胞 （PHH） 的可用性受到供体短缺的限制。因此，大量扩增PHHs具有重要价值。在这里，我们提供了来自健康供体和遗传性肝病患者的PHH（增殖人类肝细胞，ProliHHs）的大规模扩增的详细方案，这些激素可以在三维培养系统中重新成熟。此外，我们还提供了ProliHHs基因作的方案，包括慢病毒转导和CRISPR-Cas9介...

IF2 和 NusA 之间的复合物表明转录-翻译的早期偶联

翻译起始因子的主要功能是帮助核糖体在 mRNA 上选择正确的阅读框。在重构的体外系统的帮助下，这一过程已被广泛研究，但活细胞中的动力学尚未得到表征。在这项研究中，我们对细菌起始因子 IF2、IF3 以及起始剂 fMet-tRNA 进行了单分子追踪fMet直接在生长中的大肠杆菌细胞中。我们的结果揭示了因子与核糖体关联的动力学，除其他外，突出了 IF2 和 IF3 在该过程中各自的拮抗作用。重要的是，我们对两种天然存在的 IF2 亚型的体内...

囊胚互补产生Flk-1敲除嵌合小鼠驻留巨噬细胞的衍生和肿瘤微环境的构建

肿瘤微环境（TME）与癌症进展和治疗耐药性密切相关。尽管已经通过将人类细胞移植到免疫缺陷小鼠体内来开发人源化小鼠模型，但它们未能完全重建TME。使用 Flk-1（Vegfr2，Kdr）敲除宿主进行囊胚互补提供了一种潜在的解决方案。然而，利用囊胚互补生成种间人鼠嵌合体尚未成功。作为基础步骤，本研究旨在证明可以在种内嵌合小鼠中使用这种方法构建供体来源的TME。我们通过将 Azami-Green （AG） 阳性 C57BL/6 （B6） 小鼠...

重组山羊和犊牛凝乳酶的生化性质比较及其在乳制品加工中的影响

羊奶的营养和功能特性是公认的。然而，在用羊奶制作奶酪时使用骆驼和小牛来源的凝乳糖素会导致生产率相对较低。本研究旨在生产重组山羊乳糜蛋白，并研究其在山羊奶和牛奶中的生化性质和凝乳活性。为了实现这一目标，重组山羊凝乳酶在毕赤酵母中成功表达，产生了 148,000 单位/升的酶活性。重组山羊乳糜蛋白在两种牛奶类型中在60 °C时均表现出最大的酶活性，而重组犊牛乳酶在65 °C时对山羊奶表现出最大活性，在75 °C对牛奶时表现出最大活性。此外，...

DLC1-SF3B1-PHF5A剪接复合物对躯干神经嵴细胞命运和剪接扰动敏感性的测定

普遍表达的剪接因子如何特异性调节神经嵴 （NC） 发育并增强其对剪接扰动的脆弱性仍然知之甚少。在这里，我们表明，NC特异性DLC1与SF3B1-PHF5A剪接复合物合作，通过调节NC说明符SOX9和SNAI2前体mRNA而不是其上游调节因子BMP4，WNT1和PAX7的剪接，对于确定鸟类树干NC细胞的命运至关重要。 从机制上讲，SF3B1-PHF5A与所有因子的内含子分支位点（BS）序列结合，而DLC1与SOX9和SNAI2的BS序列附...

肠簇细胞亚型代表由隐窝-绒毛信号梯度驱动的连续成熟阶段

肠簇细胞是上皮前哨细胞，在检测到寄生虫衍生的化合物后触发宿主防御。虽然它们代表了炎症驱动的肠道疾病免疫调节疗法的有效靶点，但人们对它们的功能和分化知之甚少。在这里，我们揭示了先前描述的小鼠和人类簇绒-1和簇绒-2亚型中常见的中间转录组。类器官中簇绒细胞亚型特异性报告基因敲入表明，这两种亚型反映了簇绒细胞谱系内连续的有丝分裂后成熟阶段。白细胞介素-4和13的体外刺激足以促进由簇绒前体（tuft-p）产生的新Nrep + 簇绒-1细胞的产生...

靶向SLC7A5治疗肺鳞状细胞癌：对癌症代谢转变和硼中子捕获治疗耐药性的影响

由于缺乏有效的治疗方法，鳞状细胞癌 （SCC） 构成了重大的全球健康挑战。硼中子俘获疗法（BNCT）是一种靶向粒子疗法，在各种癌症中显示出有希望的结果。SLC7A5 是 BNCT 中使用的必需氨基酸和硼苯丙氨酸 （BPA） 的转运蛋白，成为潜在的治疗靶点。然而，其在不同组织学亚型中的表达以及 SLC7A5 抑制在对 BPA-BNCT 耐药性中的作用仍然知之甚少。我们的研究表明，大多数 SCC 中的 SLC7A5 表达升高，特别是在肺鳞状...

祖细胞能力的时间控制决定了小鼠 GABA 能神经元发育的成熟

不同类型的 GABA 能投射神经元和端脑中间神经元来源于称为神经节隆起的腹侧生发区的祖细胞。使用单细胞转录组学、染色质可及性分析、谱系追踪、出生日期、跨发育阶段的移植和小鼠胚胎的扰动测序，我们研究了祖细胞能力如何影响这些神经元的成熟和分化。我们发现，神经发生的时间进程塑造了神经节隆起祖细胞的成熟能力，影响它们的后代如何走向成熟状态。相比之下，分化能力（定义为祖细胞产生不同转录组身份的能力）在整个神经发生过程中保持不变。染色质重塑与由转录...

质粒中 IL-12 和 CD40 配体 （CD154） 的瘤内表达产生消除肿瘤 T reg 的抗肿瘤反应

瘤内免疫疗法 （ITIT） 致力于通过直接刺激肿瘤中的免疫系统来逆转局部肿瘤介导的免疫抑制，从而产生有效的抗肿瘤免疫。使用体内质粒转染作为瘤内癌症免疫疗法的白细胞介素 12 （IL-12） 的体内表达进入转移性黑色素瘤的 II 期临床试验，但临床成功率有限。我们试图通过在编码 IL-12 的质粒治疗中加入表达 CD154 （CD40 配体） 的质粒来提高体内 IL-12 电穿孔的疗效，并评估对实体瘤的疗效。患有皮内 B16F10 黑色素...