HLA-A*02 患者 PRAME 晚期实体瘤的自体 T 细胞疗法：1 期试验++

与嵌合抗原受体 T 细胞相比，T 细胞受体 （TCR） 工程改造的 T 细胞可以靶向对治疗实体瘤至关重要的细胞内肿瘤相关抗原。然而，迄今为止发表的大多数试验显示临床活性有限。在这里，我们报告了一项首次人体、多中心、开放标签、3 + 3 剂量递增/递减递级 1 期试验的中期数据，该试验研究了 IMA203，IMA203 是一种自体黑色素瘤优先表达抗原 （PRAME） 定向的 TCR T 细胞疗法，用于 HLA-A*02 患有 PRAME ...

用于诊断的工程耦合基于联盟的生物传感器

合成多细胞系统在执行复杂任务方面具有巨大潜力，包括通过细胞间通信进行多信号检测和计算。然而，设计这些系统具有挑战性，需要精确控制不同成员的细胞浓度并协调它们的活性。在这里，我们为血红素和乳酸开发了一种基于细菌联盟的生物传感器，其中成员通过全局共享群体感应信号耦合，同时控制不同生物传感菌株的活性。多细胞系统包含一个基因电路，该电路计算每个生物传感器的活动与共享信号之间的最小值。我们评估了三种联盟配置：一种共享信号由外部提供，另一种通过诱导...

揭示 Nitroxoline 活性谱、作用方式和革兰氏阴性菌的耐药性

Nitroxoline 是一种抑菌喹啉抗生素，已知会与金属形成络合物。其临床适应症仅限于无并发症的尿路感染，易感断点仅适用于大肠杆菌。在这里，我们测试了 1000 临床分离株，并展示了更广泛的活性谱和物种特异性杀菌活性，包括由于多药耐药性而治疗选择受限的革兰氏阴性菌。通过将遗传学和蛋白质组学方法与细胞内金属的直接测量相结合，我们表明硝氧啉充当金属载体，诱导细菌细胞中的铜和锌中毒。该化合物对细菌生理学有额外的影响，包括改变外膜完整性，这支...

HIF-1 调节骨髓来源的巨噬细胞的线粒体功能，但不调节组织驻留肺泡巨噬细胞的线粒体功能

HIF-1α 在塑造巨噬细胞表型和效应器功能中起关键作用。我们之前已经表明，组织驻留的肺泡巨噬细胞 （TR-AMs） 在稳态下具有极低的糖酵解能力，但在缺氧条件下可以转向糖酵解。在这里，我们生成了具有他莫昔芬诱导的髓系细胞特异性缺失 Hif1a （Hif1aFL/FL名称：LysM-CreERT2+/−） 从这些小鼠中，我们分离出 TR-AM 和骨髓衍生的巨噬细胞 （BMDM），其中 Hif1a 被删除。我们表明 TR-AM HIF-1...

GRASP 在新皮层发育过程中将 Reelin 连接到高尔基体，以控制神经元迁移和树突生成

Reelin 是脑器官发生的关键调节因子，在神经元定位和树突生成中发挥重要作用。在亚细胞水平上，它影响高尔基体的易位和重塑。尽管它很重要，但 Reelin 在神经元迁移和树突形成过程中控制高尔基体的机制在很大程度上仍然未知。这项研究表明，Reelin 促进高尔基体重组装堆积蛋白 （GRASP） 的从头翻译，这对于 Reelin 在皮层神经元上的功能至关重要。胚胎新皮层迁移的兴奋性神经元中 GRASP 的下调导致细胞在迁移的多极阶段定向障...

全基因组 CRISPR 筛查确定 BUB1 激酶是恶性胸膜间皮瘤中的可成药脆弱性

恶性胸膜间皮瘤 （MPM） 是一种罕见但高度侵袭性的恶性肿瘤，预后严重。由于缺乏有效的治疗方式，MPM 仍然是一项艰巨的健康挑战。因此，确定可作的责任对于推进精准医疗以对抗这种致命疾病至关重要。在这里，我们利用无偏倚的全基因组 CRISPR 筛选，将三种 MPM 细胞系与非恶性间皮细胞整合和交叉比较，以选择性地定位其耗竭表明在 MPM 细胞中具有共同依赖性的基因靶标。这种系统的方法揭示了一组可验证的基因，其中 BUB1 是一种有丝分裂检...

光促素将蓝光感知与绿藻中的淀粉代谢联系起来

在光合生物中，光充当控制其发育和生理的环境信号，以及驱动 CO 转化的能源2转化为用于生长或储存的碳水化合物。绿藻中的主要储存碳水化合物是淀粉，它在白天积累，在晚上被分解以满足细胞的能量需求。光质量在淀粉积累调节中的信号传导作用仍未得到探索。在这里，我们确定 PHOTOTROPIN MEDIATED SIGNALING KINASE 1 （PMSK1） 是莱茵衣藻淀粉代谢的关键调节因子。磷酸化形式 （PMSK1-P） 可激活甘油醛-3-...

一种可调且多功能的化学遗传学近红外荧光报告基因

近红外 （NIR） 荧光报告基因为多路复用成像开辟了有趣的前景，使用毒性较小的光，具有更高的对比度和深度。在这里，我们提出了 nirFAST，一种小的 （14 kDa） 生化 NIR 荧光报告基因，与性能最佳的 NIR 荧光蛋白相比，显示出更高的细胞亮度。nirFAST 结合并稳定合成细胞通透性荧光发色团（所谓的荧光染料）的荧光状态，否则在游离时会变暗。nirFAST 通过荧光原的变化显示可调的 NIR、远红光或红光发射。nirFAST...

pcnB 缺失通过减少 ColE1 家族质粒的拷贝数来影响耐药大肠杆菌的抗生素敏感性

摘要：质粒在细菌中抗生素抗性基因的传播中起主要作用。质粒拷贝数 （PCN） 通常受到严格监管。在 ColE1 型质粒中，这种调节通过使用反义 RNA 的负反馈机制发生。在这里，我们采用基于测序的方法来测定 PCN，以证明在抗生素治疗期间，携带抗生素耐药基因的不同 ColE1 家族质粒的拷贝数增加。此外，我们表明基因 pcnB 的缺失降低了大肠杆菌 MG1655 中 ColE1 家族质粒的拷贝数，这反过来又导致对氨基糖苷类、β-内酰胺类和...

溶酶体 NKG7 抑制 mTORC1 活性，促进 CD8 T 细胞持久性和肿瘤控制+

摘要：在感染和癌症期间，mTORC1 介导的代谢调节会影响 CD8 T 细胞效应子扩增和记忆发育。然而，CD8 T 细胞调节 mTORC1 以支持其独特代谢需求的机制仍然未知。在这里，我们表明 NKG7 是一种溶酶体蛋白，其表达仅限于细胞毒性淋巴细胞，通过抑制溶酶体质子泵液泡 ATP 酶 （v-ATP 酶） 的组装和功能来负向调节 mTORC1 募集和激活。缺乏 NKG7 的人和小鼠 CD8 T 细胞显示出更多的酸性溶酶体和 mTORC...

视觉引导体内单细胞电穿孔，用于监测和作哺乳动物海马神经元

摘要：稀疏的单细胞标记方法能够从亚细胞区室和细胞内细胞器进行高分辨率、高信噪比的记录，并允许对单个细胞和局部电路进行精确作，同时最大限度地减少与全局网络作相关的复杂变化。然而，到目前为止，只有有限数量的方法可以用基因编码指标的独特组合来标记单个细胞，靶向深层皮层结构或可持续地使用相同的慢性制剂数周。在这里，我们开发了一种使用双光子视觉引导体内单细胞电穿孔将质粒选择性递送到小鼠背侧海马体中的单个锥体神经元的方法，以解决这些限制。该方法允许...

Doublecortin 通过调节微管蛋白多谷氨酰化来限制神经元分支

摘要：Doublecortin 是一种神经元微管相关蛋白，可调节神经元中的微管结构。Doublecortin 突变通过损害神经元迁移导致无脑畸形和皮质下带异位。我们使用 CRISPR/Cas9 敲除诱导多能干细胞中的 Doublecortin 基因，并将细胞分化为皮层神经元。DCX-KO 神经元在神经元发育早期表现出核运动速度降低和神经突数量增加，这与以前的发现一致。神经突分支受大量微管相关蛋白以及微管聚合动力学的调节。然而，EB 彗星...