MARTRE 家族蛋白负向调节 CCR4-NOT 活性，以保护 poly（A） 尾长并促进母体 mRNA 的翻译

哺乳动物的早期胚胎发育需要翻译从卵母细胞遗传的母体 mRNA。虽然 poly （A） 尾长会影响卵母细胞到胚胎转化 （OET） 期间的 mRNA 翻译效率，但调节母体 RNA poly （A） 尾长的分子机制尚不完全清楚。在这项研究中，我们确定了 MARTRE，一个以前未表征的蛋白质家族 （MARTRE1-MARTRE6），作为小鼠 OET 期间表达的调节 poly （A） 尾长的调节因子。MARTRE 通过与脱腺苷酶 CCR4-NOT...

正交 RNA 复制在哺乳动物细胞中实现定向进化和达尔文适应

哺乳动物细胞的定向进化为推进合成生物学应用提供了一种强大的方法。然而，现有的基于哺乳动物的定向进化方法面临巨大的瓶颈，包括宿主基因组干扰、小文库大小和不受控制的诱变。在这里，我们设计了一个正交的 α 病毒 RNA 复制系统来进化基于 RNA 的设备，从而在增殖的哺乳动物细胞中实现 RNA 复制酶辅助连续进化 （REPLACE）。该系统通过复制酶限制的复制和诱导诱变模式产生一个大型的、连续多样化的复制 RNA 文库。使用 REPLACE，...

SYK 融合激酶中 N 末端区域的差异调节作用揭示了 ITK-SYK 独特的激活诱导核转位

ITK-SYK 和 TEL-SYK（也称为 ETV6-SYK）是人致瘤嵌合蛋白，分别包含 SYK 的激酶区和 ITK 的膜靶向、N 末端、PH-TH 结构域双峰或 TEL 的二聚化 SAM-PNT 结构域。ITK-SYK 导致外周 T 细胞淋巴瘤，而 TEL-SYK 见于骨髓增生异常综合征。BTK 是一种与 ITK 高度相关的激酶，为了进一步描述 N 端的作用，我们生成了相应的融合激酶 BTK-SYK。通过生成和分析这些融合激酶，我们旨...

琼脂糖水凝胶介导的电穿孔方法，用于在气液界面培养的视网膜组织

在气液界面培养离体视网膜和其他组织以实现更有效的气体交换是有利的。然而，将基因递送到这些培养物可能具有挑战性。电穿孔是一种快速而稳定的基因递送方法，但通常需要浸没在液体缓冲液中以使电流流动。我们开发了一种无浸没电穿孔技术，该技术在正电极和视网膜之间包含一个琼脂糖水凝胶盘。在长时间培养后，视网膜内神经元和 Müller 胶质细胞转染的倾向增加。我们还观察到电刺激后 BrdU 在 Müller 胶质细胞中掺入的增加，以及从具有不同启动子的表...

通过连续微流控电穿孔芯片扩大 CRISPR/Cas9 基因编辑的细胞数量

CRISPR/Cas9 介导的基因编辑为多种疾病提供了有前途且安全的治疗选择。在短时间内有效获取大量基因编辑治疗细胞的技术难题阻碍了 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑的广泛临床应用。在此，已经开发了一种大容量连续电穿孔芯片 （LaViE-Chip） 来应对获取足够数量的基因编辑细胞用于 CRISPR/Cas9 基因编辑的挑战。通过并联多个相对较窄的微流体通道，两个简单的片外电极在细胞流体积和电场均匀性之间实现了令人满意的平衡，这也...

合成的固有无序蛋白质融合标签，可增强蛋白质溶解度

我们报道了小 （20 kDa） 和高可溶性合成固有无序蛋白 （SynIDP） 的从头设计，这些蛋白赋予融合伴侣溶解度，而对融合蛋白活性的影响最小。为了鉴定高度可溶的 SynIDP，我们利用一锅法基因合成技术创建了一个混合基因文库，以创建一个编码 SynIDP 的大型重复基因文库。我们从该基因文库中鉴定了三个小 （20 kDa） 和高可溶性 SynIDP，它们缺乏二级结构且具有高溶剂化。这些 SynIDP 与三种已知包涵体形成蛋白的重组融...

肝 SerpinA1 通过调节前脂肪细胞增殖和 UCP1 表达来改善能量和葡萄糖代谢

脂肪代谢障碍和肥胖与胰岛素抵抗和代谢综合征有关，并伴有脂肪组织失调。在这里，我们表明，在小鼠脂肪细胞特异性胰岛素信号丢失引起的脂肪代谢障碍中恢复期间，肝脏中的丝氨酸蛋白酶抑制剂 A1 （SerpinA1） 表达增加。SerpinA1 诱导白色和棕色前脂肪细胞的增殖，并增加解偶联蛋白 1 （UCP1） 的表达，以促进成熟白色和棕色脂肪细胞中的线粒体活化。肝脏特异性 SerpinA1 转基因小鼠表现出脂肪组织褐变增加，导致能量消耗增加、肥胖...

信号素 3A 排斥指导发育中的鸡脑中先锋纵向轴突的尾部投影

内侧纵束 （MLF） 是在腹侧脊椎动物大脑中发育的第一个轴突束。它起源于间脑，向尾部投射到脊髓中，为后来的轴突发育开辟了道路。先前对鸡的解剖学和表达分析表明，信号素 3 A （Sema3A） 是排斥前脑羊膜 MLF 的候选者。然而，对斑马鱼的研究表明，一种远亲信号素在轴突肌束形成中发挥作用，而不是引导。因此，解释 MLF 尾部投影的机制仍不清楚。在这里，我们表明 Sema3A 的错误表达或表达 Sema3A 的细胞移植到 MLF 的路径...

mRNA 疫苗通过激活 DNA 损伤修复和自噬来诱导抗分枝杆菌免疫

迫切需要有效的疫苗来控制结核病 （TB）。在这里，我们报道了 mRNA 结核病疫苗非常有效，并且在斑马鱼结核病模型中表现出预防和治疗活性。与接种 DNA 疫苗的斑马鱼相比，接种 mRNA 疫苗的成年斑马鱼在海洋分枝杆菌攻击后的存活时间明显更长。此外，感染后使用 mRNA 疫苗进行治疗大大降低了细菌负荷。mRNA 疫苗激活了多个 DNA 断裂修复系统，这些系统对适应性免疫的正常发育和功能至关重要，但没有激活促进细胞死亡的经典 DNA 损伤...

南通市崇川区领导赴中科国腾考察交流，共商合作发展新机遇

2024 年 12 月 11 日，南通市崇川区区长杨万平率队赴合肥中科国腾生物科技有限公司进行考察交流，双方就项目合作事宜展开深入探讨。中科国腾创始人、首席科学家金腾川，总经理成斌等人员热情接待了来访嘉宾。中科国腾董事长金腾川详细介绍了公司的项目情况，包括核心技术、研发进展、市场前景以及未来规划，让来访领导对中科国腾的综合实力有了全面了解。在交流讨论环节，双方围绕中科国腾与南通市崇川区的合作事宜进行了热烈的探讨。董事长金腾川为各位到访领...

使用 TYPE IE CRISPR-Cas3 在小鼠和大鼠受精卵中进行基因组编辑

I 型 CRISPR 系统最近成为一种很有前途的工具，尤其是对于大规模基因组修饰，但它通过编辑受精卵生成模型动物的应用尚未建立。在这项研究中，我们展示了使用 TYPE I-E CRISPR-Cas3 系统在受精卵中进行基因组编辑，该系统以 40%-70% 的编辑效率在小鼠的靶向基因座上有效地生成数千个碱基对的缺失，而没有脱靶突变。为了克服与检测变量缺失相关的困难，我们使用了一种新的基于长读长测序的多重基因分型方法。我们基于 Cas3 的...

通过随机整合产生的重组中国仓鼠卵巢细胞中抗体产生的环境依赖性基因组基因座效应

使用中国仓鼠卵巢 （CHO） 细胞高产生产治疗性蛋白质 需要稳定的细胞系开发 （CLD）。CLD 通常使用转基因的随机整合;然而，这会导致克隆变异和随后费力的克隆筛选。因此，蛋白质表达盒与表现出高转录活性和稳定性的所需染色体位点的位点特异性整合（称为热点）正在出现。尽管位置效应对于治疗性蛋白质表达很重要，但热点起作用的序列特异性机制尚不清楚。在这项研究中，我们进行了全基因组测序 （WGS），以定位表达高水平单克隆抗体 （mAb） 的重组...