人肝细胞扩增及其在三维培养和基因作中的应用

肝细胞是肝脏中最重要的细胞类型之一，执行关键功能。它们对于基于肝细胞的治疗、疾病建模和药物开发至关重要。然而，原代人肝细胞 （PHH） 的可用性受到供体短缺的限制。因此，大量扩增PHHs具有重要价值。在这里，我们提供了来自健康供体和遗传性肝病患者的PHH（增殖人类肝细胞，ProliHHs）的大规模扩增的详细方案，这些激素可以在三维培养系统中重新成熟。此外，我们还提供了ProliHHs基因作的方案，包括慢病毒转导和CRISPR-Cas9介导的敲除和敲入。此处描述的方案将有助于充分发挥基于ProliHH的治疗、基于类器官的肝病建模和药物筛选的潜力。扩增PHH的方案需要~1-2个月，建立3D培养的ProliHH的方案需要~8天，进行基因编辑的方案需要~3天。受过基本科学培训的人员可以执行这些协议。

原标题：Expansion of human hepatocytes and their application in three-dimensional culture and genetic manipulation

通讯作者：Baihua Wu & Lijian Hui

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