促进驹形菌碱化转录反应的信号通路：转录因子 Crz1 和 Rim101 的作用

启动子能够对工业相关酵母 Komagataella phaffii 的适度碱化做出反应，已被提议作为设计用于异源蛋白质表达的新型无甲醇平台的工具。然而，这种反应的分子碱基尚不清楚。我们在这里鉴定了 K. phaffii 中的转录因子 Crz1 和 Rim101，并使用 CRISPR/Cas9 技术创建单突变和双突变菌株。虽然 crz1 细胞对 Ca 非常敏感2+离子，对碱性pH值轻度敏感，对SDS过耐受，rim101细胞对Na和Li离子，碱性pH值和SDS明显过敏。RNA-seq 分析显示，RIM101 的突变会影响 55% 的碱性 pH 响应基因，而缺乏 Crz1 仅改变其中的 11%。38 个基因由 Crz1 和 Rim101 共同调控。PMC1液泡Ca++2+-ATPase 受 Crz1 调节，而 ENA2 Na-ATP 酶、PHO89 和 PHO84 磷酸转运蛋白以及参与铁稳态的多种基因是 Rim101 依赖性的。碱化3小时后通过蛋白质组学分析证实了这些影响。因此，Rim101 在碱化转录反应中发挥了重要作用，与 Crz1 一起占 K. phaffii 碱性 pH 转录反应的近 60%。

原标题：Signaling pathways contributing to the transcriptional response to alkalinization in Komagataella phaffii: role of the transcription factors Crz1 and Rim101

通讯作者：Asier González & Joaquín Ariño

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