由铜绿假单胞菌中 nrdAB纵子编码的 Ia 类核糖核苷酸还原酶 (RNR) 具有长 5' 非翻译区 (5' UTR),其调节作用仍知之甚少。在这项研究中,我们使用一套全面的生物信息学和实验方法研究了 nrdAB 5' UTR 的功能意义,包括基因表达谱、相对蛋白质水平和 Galleria mellonella 动物模型中的体内感染测定。我们的结果表明,5' UTR 通过降低转录水平、降低 mRNA 稳定性和限制蛋白质丰度来负调控 nrdA 表达。该区域的截断导致表达增加,特别是在静止期,这表明该区域可能有助于调节 RNR 活性在静止期,此时 dNTP 需求减少。在体内,与野生型菌株相比,Δ5' UTR 突变体表现出降低的毒力,伴随着 nrdA mRNA 水平升高和 nrdJ 表达适度降低。尽管这些变化可能导致感染期间 RNR 调节的改变,但它们不太可能完全解释观察到的表型,表明可能涉及其他因素。尽管在测试条件下没有探测到5' UTR内或作用于5'UTR的特定调控元件,但不能排除这种机制的可能性,需要进一步的研究来阐明潜在的分子机制。总体而言,我们的研究结果表明,5' UTR 在调节 nrdAB纵子表达中起调节作用,并有助于维持铜绿假单胞菌的 RNR 系统稳态。
原标题:The long 5′ UTR of nrdAB modulates mRNA levels, stability, and virulence in Pseudomonas aeruginosa PAO1
通讯作者:Lucas Pedraz & Eduard Torrents
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