琼脂糖水凝胶介导的电穿孔方法，用于在气液界面培养的视网膜组织

在气液界面培养离体视网膜和其他组织以实现更有效的气体交换是有利的。然而，将基因递送到这些培养物可能具有挑战性。电穿孔是一种快速而稳定的基因递送方法，但通常需要浸没在液体缓冲液中以使电流流动。我们开发了一种无浸没电穿孔技术，该技术在正电极和视网膜之间包含一个琼脂糖水凝胶盘。在长时间培养后，视网膜内神经元和 Müller 胶质细胞转染的倾向增加。我们还观察到电刺激后 BrdU 在 Müller 胶质细胞中掺入的增加，以及从具有不同启动子的表达载体中检测转染细胞的变化。这种方法提高了我们使用离体视网膜组织进行遗传研究的能力，并且应该适用于在气液界面培养的其他组织。