通过连续微流控电穿孔芯片扩大 CRISPR/Cas9 基因编辑的细胞数量

CRISPR/Cas9 介导的基因编辑为多种疾病提供了有前途且安全的治疗选择。在短时间内有效获取大量基因编辑治疗细胞的技术难题阻碍了 CRISPR/Cas9 介导的基因编辑的广泛临床应用。在此，已经开发了一种大容量连续电穿孔芯片 （LaViE-Chip） 来应对获取足够数量的基因编辑细胞用于 CRISPR/Cas9 基因编辑的挑战。通过并联多个相对较窄的微流体通道，两个简单的片外电极在细胞流体积和电场均匀性之间实现了令人满意的平衡，这也将电极周围的有害影响与目标细胞隔离开来。同时，通过精心设计微流控通道的曲率，实现了靶细胞的流体动力学控制旋转，从而提高了转染效率和细胞活力。通过这些改进，LaViE-Chip 实现了 71.06% 的电转染效率、84.3% 的细胞活力和 107cell/min 细胞处理速度。此外，首次通过电穿孔成功连续编辑 CRISPR 基因，为治疗性 CRISPR 基因编辑奠定了技术基础。