合成的固有无序蛋白质融合标签，可增强蛋白质溶解度

我们报道了小 （<20 kDa） 和高可溶性合成固有无序蛋白 （SynIDP） 的从头设计，这些蛋白赋予融合伴侣溶解度，而对融合蛋白活性的影响最小。为了鉴定高度可溶的 SynIDP，我们利用一锅法基因合成技术创建了一个混合基因文库，以创建一个编码 SynIDP 的大型重复基因文库。我们从该基因文库中鉴定了三个小 （<20 kDa） 和高可溶性 SynIDP，它们缺乏二级结构且具有高溶剂化。这些 SynIDP 与三种已知包涵体形成蛋白的重组融合可挽救其可溶性表达，并且不会阻碍融合伴侣的活性，因此无需去除 SynIDP 标签。这些发现强调了 SynIDPs 作为溶解度标签的效用，因为它们促进蛋白质在大肠杆菌中的可溶性表达，并且是小的、非结构化的蛋白质，对融合蛋白的生物活性的干扰最小。