通过电穿孔在 3D 重建的人真皮组织中转染成纤维细胞

对人体皮肤中 DNA 电转移所涉及的机制的理解仍然不多，并限制了各种生物医学应用的临床开发，例如 DNA 疫苗接种。为了阐明电穿孔后皮肤中 DNA 转移的一些机制，我们使用组织工程方法创建了一个真皮模型。该模型使我们能够在三维环境中研究成纤维细胞的电转染，其中包括多层成纤维细胞以及自分泌的胶原蛋白基质。为了提高转染产量，我们应用了电脉冲具有垂直于重建模型组织的电场线。我们的结果表明，重建皮肤组织的成纤维细胞可以通过施加毫秒电脉冲有效地透化。然而，尽管有效地透化，转染的细胞仍然仅定位于质粒沉积的微组织表面。二次谐波生成显微镜揭示了成纤维细胞周围广泛的细胞外胶原基质，这可能会影响质粒向皮肤组织模型更深层的迁移性。我们的结果表明，使用过的皮肤组织模型再现了可能导致皮肤中有限基因电转移的结构屏障。