用于高效细胞转染的多重微流控连续流电穿孔系统

细胞疗法有可能推进对多种疾病的治疗，但依赖于病毒进行基因重编程。生产病毒所需的时间和成本造成了瓶颈，限制了细胞疗法的开发和可及性。电穿孔是一种绕过这些瓶颈的基因重编程的非病毒替代方案，但目前的电穿孔技术存在通量低、优化繁琐且难以扩展到大规模细胞生产的问题。在这里，我们提出了一个适应性强的微流体电穿孔平台，该平台能够对 96 孔板进行快速、多路复用优化。一旦使用小体积细胞优化了参数，转染就可以无缝扩展到大批量细胞生产，而无需重新优化。我们展示了优化质粒 DNA 到 Jurkat 细胞的转染，使用每个波形 ~20 μL 的细胞，以每个波形 ~3 秒的速度筛选数百个不同形状的不同电波形。我们使用小体积流动槽选择了一组最佳的转染参数。然后将这些参数用于单独的大容量流动槽，通过设计获得相似的转染性能。这展示了一种替代的非病毒且经济的转染方法，可在不牺牲性能的情况下放大到生产细胞疗法所需的体积。重要的是，这种转染方法与疾病无关，其应用范围广泛，超越了细胞疗法。