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一种优化的培养系统,用于从植入前胚胎和重新编程体细胞中高效提取猪扩增的潜力干细胞

猪与人类具有相同的解剖和生理特征,可以作为转化医学的大型动物模型。真正的猪多能干细胞 (PSC) 可以促进细胞和药物治疗的测试。农业和生物技术可能受益于产生免疫细胞以研究动物传染病的能力,以及在干细胞中轻松编辑猪基因组的能力。在过去的几十年里,人们一直在密集尝试从植入前胚胎中分离猪 PSC。我们之前报道了从植入前胚胎和通过重编程多种哺乳动物物种(包括猪)的体细胞衍生出扩增的潜力干细胞 (EPSC)。猪 EPSC (pEPSC) 无限期自我更新,分化为胚胎和胚胎外谱系,并允许精确的基因组编辑。在这里,我们提出了一种高度可重复的实验程序和数据,即优化和强大的猪 EPSC 培养系统及其在从植入前胚胎和重编程体细胞衍生新 pEPSC 系的用途。这些方案不需要特别的专业知识,需要 ~4-6 周才能完成。重要的是,我们成功地从体外受精和体细胞核移植衍生的胚胎中建立了 pEPSC 系。这些新的 pEPSC 系在长期传代中稳健增殖,并且适用于简单插入缺失和精确基因组编辑,靶向效率高达 100%。pEPSCs 在体外分化为胚胎细胞谱系,在体内分化为畸胎瘤,并在人滋养层干细胞培养基中分化为猪滋养层干细胞。我们在这里表明 pEPSCs 具有独特的表观遗传特征,特别是 H3K27me3 水平大大低于成纤维细胞。

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