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比较化学转染、电穿孔和慢病毒载体转导,以在 Vero 细胞系中实现最佳转染条件

背景:转染是研究细胞环境中基因表达的重要分析方法。在宿主细胞中进行高效 DNA 转染存在一些障碍,包括绕过质膜、逃避内体区室化、自噬、免疫感应途径和易位核膜。因此,引入最佳转染方法以在 Vero 细胞系中实现高转染效率将非常有用。本研究的目的是比较各种转染技术,并引入一种在 Vero 细胞中进行基因递送的高效方法。

方法:在本研究中,使用了化学转染、电穿孔和慢病毒载体转导三种转染方法,以获得 Vero 细胞系中的最佳转染条件。在不同的实验条件下培养 Vero 细胞,并用化学转染试剂、电穿孔或基于 HIV-1 的慢载体转染。使用流式细胞术和荧光显微镜检测 GFP 阳性细胞评估转染效率。

结果:在测试方法中,TurboFect™ 化学转染表现出最高的效率。在 6 × 中使用 1 μg DNA 和 4 μL TurboFect™ 实现最佳转染条件 104Vero 细胞。

结论:TurboFect™ 是一种阳离子聚合物转染试剂,与电穿孔和慢病毒颗粒相比,在 Vero 细胞中表现出优异的转染效率,是 Vero 细胞系中化学转染的最佳选择。

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