缓冲液组成和质粒毒性对利用纳秒和微秒脉冲在哺乳动物细胞中电穿孔非病毒基因传递的影响

基因电转移 （GET） 是一种非病毒基因递送技术，也称为电穿孔介导的基因递送或电转染。GET 是一种通过施加外部脉冲电场 （PEF） 在细胞膜上产生临时孔，将外来遗传物质（如 DNA 或 RNA）引入细胞的方法。本研究旨在检查缓冲液组成对哺乳动物细胞中 GET 效率的影响此外，我们专门比较了高频纳秒 （ns） 脉冲与标准微秒 （μs） 脉冲的有效性。为了评估细胞转染效率和活力，进行了流式细胞术分析、发光测定和代谢活性测量。使用两种编码质粒的不同蛋白质 （pEGFP-N1 和 Luciferase-pcDNA3） 评估电转染效率。研究表明，电穿孔缓冲液的组成显着影响 CHO-K1 细胞系中 GET 的功效。报道了细胞系对电场和质粒细胞毒性的不同敏感性。研究还表明，使用纳秒级 PEF 方案的电穿孔可确保与标准 μsPEF 相当甚至更好的转染效率。此外，我们成功地使用高频纳秒 PEF 对小鼠 4T1 细胞系进行了长期转染，并证实了其在体内模型中的适用性。研究结果可用于优化电转染条件。