电穿孔缓冲液组成对细胞存活率及电转染效率的影响

        电穿孔是一种电物理、非病毒的方法，用于对细胞进行DNA、RNA和蛋白质转染。施加电场时，细胞膜被破坏，允许外源性物质进入细胞。细胞存活率和电转染效率（eTE）依赖于多种实验因素，包括脉冲波形、矢量浓度、细胞类型/密度以及电穿孔缓冲液的特性。本研究系统性探讨了缓冲液成分对细胞存活率和eTE的影响，适用于3T3成纤维细胞电穿孔后编码绿色荧光蛋白的质粒DNA。基于HEPES的缓冲剂与各种盐类和糖类结合使用，分别调节电导率和渗透压。选择脉冲应用以保持恒定的施加电能（J）或总电荷通量（C/m）2).脉冲施加的能量主要决定细胞的存活能力，镁2+基于缓冲液的可逆电穿孔范围扩大。镁的生存能力提升2+基于缓冲液的假设认为，这种增强是由于ATP酶通过重新建立离子稳态激活所致。我们通过引入利多卡因（一种ATP酶抑制剂）消除了增强的生存能力，展示了该机制的初步证据。然而，Mg2+与基于K的缓冲区相比，eTE也受阻。综合来看，结果表明，合理选择脉冲条件和缓冲剂组成对于设计电穿孔方案以最大化可行性和eTE至关重要。

       原标题：The effects of electroporation buffer composition on cell viability and electro-transfection efficiency

       通讯作者：Jeffrey D. Zahn

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