在新型细胞基治疗药物制造中应用如CRISPR/Cas9等基因编辑技术,有望实现高度靶向、稳定且持久的基因组修饰,而无需使用病毒载体。电穿孔已成为将基因编辑设备送达靶细胞的首选方法,但一个主要挑战是大多数商用电穿孔机是为研究和工艺开发而设计,而非大规模自动化细胞疗法制造。本文介绍一种微流控连续流电转染装置,旨在精准、一致且高通量地对细胞治疗制造应用中的目标细胞进行基因改造。我们优化了将mRNA输送到原代人类T细胞的设备,展示了高达95%的转染效率,且对细胞存活率和扩增潜力影响最小。我们还展示了以每分钟2000万细胞的速度处理多达5亿个T细胞的样本。我们预计,我们的设备将有助于简化需要10种数量的自体治疗的生产–10并且它非常适合大规模生产数万亿细胞,以支持新兴的异基因疗法。
原标题:High-throughput continuous-flow microfluidic electroporation of mRNA into primary human T cells for applications in cellular therapy manufacturing
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