利用含有CRISPR碱基编辑系统的可移除载体，在海洋微藻Nannochloropsis oceanica中进行双股断裂和无转基因基因组编辑

藻类积累脂质使其在碳中和燃料生产中具有吸引力;然而，藻类脂质的工业化生产尚未实现。目前，研究人员正尝试利用CRISPR-Cas9进行基因组编辑以提高藻类菌株的脂质生产率，以实现基因组信息的高效改变。然而，基于CRISPR的双链断裂基因修饰有时会引起对宿主细胞有毒的意外大缺失。本研究中，我们将胞苷碱基编辑器结合含有着丝粒和自主复制序列的同胞载体载体主链应用于海洋微藻Nannochloropsis oceanica。胞嘧啶碱基编辑器利用脱氨酶引入胞苷至胸腺嘧啶碱基替代，且采用同胞体载体实现碱基替换后质粒的去除。我们成功诱导了五个内源基因的六个目标位点的胞苷至胸苷替代。碱基替代活性在蛋白邻接基序的第16至19位的胞苷碱基上范围为29.2%至47.6%。还检测到碱基编辑器质粒的去除，这对于构建无转基因菌株至关重要。我们的结果为后续技术在微藻基因改造中的应用提供了见解。

原标题：Tripotent Lgr5 stem cells in the posterior tongue generate lingual, taste, and salivary gland lineages

通讯作者：Takashi Yamamoto & Tomokazu Kurita

了解更多国产电转仪就选合肥中科国腾！