牡蛎寄生虫Perkinsus marinus的新型电穿孔方法的开发

基因作技术是分子生物学的基础，并且正在不断改进。然而，许多单细胞真核生物（原生生物）的基因转染方法尚未建立，从而阻碍了分子生物学研究。牡蛎寄生虫 Perkinisus marinus 是为数不多的具有成熟基因转染和药物选择的原生生物之一。然而，目前的协议很乏味，需要特定的电穿孔器和脉冲条件，这限制了该技术在不同研究小组中的可及性。在这里，我们提出了替代缓冲液和电穿孔条件，使协议的限制更少。我们揭示了使用 Ingenio 电穿孔缓冲液和 NEPA21 电穿孔器将质粒引入 P. marinus 细胞的脉冲条件。我们发现细胞数量和质粒浓度是电穿孔系统的关键参数。我们还构建了一种更简单的表达质粒，该质粒被去除了寄生虫中基因表达的不必要的区域。我们的研究结果解决了 P. marinus 电穿孔的设备限制，将为其他原生生物，特别是其他 Perkinsozoa 寄生虫和核心甲藻的电穿孔提供良好的参考。

原标题：Development of a novel electroporation method for the oyster parasite Perkinsus marinus

通讯作者：Yui Honjo & Kenji Hikosaka

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